猪鸡可食性组织中四环素类残留检测，农业部 958 号公告-2-2007

猪鸡可食性组织中四环素类残留检测的方法可以详细归纳如下：

一、检测方法概述

四环素类抗生素在猪鸡可食性组织中的残留检测主要采用色谱法，特别是高效液相色谱法（HPLC），以及免疫法等方法。这些方法能够确保对四环素类抗生素残留进行准确、可靠的测定。

二、高效液相色谱法（HPLC）

1. 样品提取：

• 称取均质好的试样，如肌肉、肝脏或肾脏组织，置于离心管中。

• 加入配置好的缓冲溶液，如EDTA-Mcllivaine缓冲溶液，进行涡旋混合和超声提取。

• 离心后合并上清液，并经过净化步骤，如使用Cleanert® PEP-2小柱进行净化。

2. 净化方法：

• 使用甲醇和水活化小柱后，准确吸取提取液过SPE小柱。

• 淋洗后减压抽干小柱，Zui后用甲醇和乙酸乙酯的混合液洗脱。

• 洗脱液经氮气吹干后，用甲醇水溶液溶解残渣，过滤待测。

3. 色谱条件：

• 色谱柱：如Durashell C18，2.1×50 mm，3 µm，100 Å。

• 流动相：通常为A相-0.3%甲酸水溶液，B相-0.3%甲酸乙腈。

• 柱温、进样量、梯度洗脱条件等根据具体方法设定。

4. 检测限和定量限：

• 在肌肉中的检测限和定量限分别为10 μg/kg和20 μg/kg。

• 在肝脏和肾脏中的检测限和定量限略高，具体数值根据方法确定。

三、免疫法

免疫法如间接酶联免疫法（ELISA）可用于快速筛选四环素类抗生素残留。该方法利用特异性抗体与四环素类抗生素结合的原理，通过测定结合程度来评估残留量。免疫法具有操作简便、快速的特点，但由于存在交叉反应和假阳性率高等问题，通常作为初筛方法使用。

四、其他注意事项

• 四环素类抗生素在酸性和碱性条件下均不稳定，提取和检测过程中需控制pH值。

• 与金属离子的络合作用可能影响检测结果，应避免使用含金属离子的容器和试剂。

• 检测过程中应严格遵守操作规范和安全规定，确保实验结果的准确性和人员的安全。