畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定，GB/T5009.116-2003

畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定，主要遵循一系列标准化的方法以确保食品安全和药物残留量的控制。以下是关于这一测定过程的详细解释：

一、适用范围
该方法适用于各种畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定。

二、Zui低检出浓度
根据参考文章，该方法的Zui低检出浓度分别为：土霉素0.15mg/kg，四环素0.20mg/kg，金霉素0.65mg/kg。这意味着该方法能够检测到这些抗生素在肉类中的极低浓度残留。

三、测定原理

1. 样品经提取后，通过微孔滤膜过滤直接进样。

2. 使用反相色谱进行分离，并利用紫外检测器进行检测。

3. 通过与标准品比较进行定量，出峰顺序为土霉素、四环素、金霉素。

4. 标准加法定量法被用于确保测定的准确性。

四、试剂准备

1. 乙腈（分析纯）。

2. 0.01mol/L磷酸二氢钠溶液。

3. 土霉素（OTC）、四环素（TC）、金霉素（CTC）标准溶液，每毫升分别含1mg相应抗生素。

4. 混合标准溶液，每毫升含土霉素、四环素各0.1mg，金霉素0.2mg。

五、仪器与条件

1. 高效液相色谱仪（HPLC）配备紫外检测器。

2. 色谱条件包括：ODS-C18柱、检测波长355nm、灵敏度0.002AUFS、柱温室温、流速1.0mL/min、进样量10μL、流淌相为乙腈/0.01mlo/L磷酸二氢钠溶液（用30%V/V硝酸溶液调整pH2.5），比例为35:65（V/V）。

六、操作方法

1. 称取适量切碎的肉样置于锥形烧瓶中，加入5%高氯酸进行振荡提取。

2. 提取液经离心后，通过适当的处理步骤（如C18相萃取柱）进行净化。

3. 使用HPLC-UV进行检测，并记录数据。

七、注意事项

1. 所有标准品和试剂应按要求保存和使用。

2. 操作过程中应注意避免交叉污染和误差。

3. 定期对仪器进行维护和校准，确保数据的准确性。

八、
畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定是一个重要的食品安全检测项目。通过严格遵循标准化的方法和使用适当的仪器与试剂，可以确保测定的准确性和可靠性，为食品安全提供有力保障。