饲料中氯羟吡啶的测定

饲料中氯羟吡啶的测定主要可以采用高效液相色谱法（HPLC）或类似的技术，以下是详细的测定步骤和相关信息：

一、测定方法

1. 高效液相色谱法（HPLC）：这是目前广泛采用的测定饲料中氯羟吡啶的方法。

二、测定步骤

1. 溶液配置

• 氯羟吡啶标准贮备液：称取1mg标准品，用甲醇稀释至10mL，溶度为0.1mg/mL，作为氯羟吡啶的贮备液。

• 氯羟吡啶标准工作液：称取1mL贮备液，用甲醇稀释至10mL，溶度为0.01mg/L，为氯羟吡啶的工作液。

2. 提取步骤

• 复合饲料（粉碎）精密称取5g样品于50mL离心管中。

• 加25mL甲醇，振荡1min，超声20min。

• 3000r/min离心5min，取10mL上清液待净化。

3. SPE净化步骤

• SPE柱：月旭Welchrom® Alumina-N，规格：5g/12mL。

• 活化：20mL甲醇平衡，弃去。

• 上样：待净化液全部上样，收集。

• 洗脱：10mL甲醇洗脱，压干收集。

• 浓缩：合并收集液于旋蒸瓶中，50℃旋蒸至干，用50%甲醇水复溶至1mL，过0.22μm有机滤头，上机检测。

4. 色谱条件

• 色谱柱：月旭Ultimate® XB-C18 4.6×150mm，5μm。

• 流动相：A-乙腈，B-水（等度A:B=10：90）。

• 流速：1.000mL/min。

• 柱温：30℃。

• 进样量：20μL。

• 检测波长：270nm（或参照其他方法中的249nm）。

5. 加标回收率与注意事项

• 加标水平：在5g样中加入0.05mL的0.01mg/mL氯羟吡啶的工作液，加标水平为0.1mg/kg，机读数为0.2mg/L。

• 注意：标准上用1mL甲醇复溶，会存在溶剂效应，这里改成用50%甲醇水。

三、

饲料中氯羟吡啶的测定通过高效液相色谱法可以准确、快速地完成。该方法涉及溶液的配置、提取、净化、色谱条件设定等步骤，确保了测定结果的准确性和可靠性。需要注意加标回收率和溶剂效应等细节问题，以确保实验结果的准确性。