肥料中粪大肠菌群的测定， GB/T 19524.1-2004

肥料中粪大肠菌群的测定可以按照以下步骤进行：

1. 在无菌操作下，称取肥料样品10.0g或吸取样品10mL，加入到带玻璃珠的90mL无菌水中。

2. 将上述混合物置于摇床上，以200r/min的速度充分振荡30min，以制成10-1稀释液。

3. 对所有的乳糖胆盐发酵管进行观察。如果所有乳糖胆盐发酵管都不产酸不产气，那么粪大肠菌群即为阴性。

4. 如果有产酸产气或只产酸的发酵管，那么需要从这些发酵管中分别挑取发酵液，并在伊红美蓝琼脂平板上进行划线。将这些平板置于36℃±1℃的条件下培养18h至24h。

5. 从上述的分离平板上挑取可疑菌落，进行革兰氏染色。如果染色反应为阳性，那么粪大肠菌群为阴性。如果为革兰氏阴性无芽胞杆菌，那么需要挑取同样的菌落接种在乳糖发酵管中，并在44.5℃±0.5℃的条件下培养24h±2h。

6. 对上述乳糖发酵管进行观察，如果不产气，那么粪大肠菌群为阴性；如果产气，那么粪大肠菌群为阳性。

7. 如果粪大肠菌群为阳性，那么需要根据粪大肠菌群阳性发酵管数，查阅MPN检索表，从而得出每克（毫升）肥料样品中的粪大肠菌群数。

以上就是肥料中粪大肠菌群的测定步骤。测定过程中需要注意无菌操作，避免污染。实验结果的准确性会受到多种因素的影响，包括样品的处理、培养条件、观察结果等，需要严格按照操作步骤进行实验，并对结果进行准确的解读。