肥料中粪大肠菌群的测定可以按照以下步骤进行:
在无菌操作下,称取肥料样品10.0g或吸取样品10mL,加入到带玻璃珠的90mL无菌水中。
将上述混合物置于摇床上,以200r/min的速度充分振荡30min,以制成10-1稀释液。
对所有的乳糖胆盐发酵管进行观察。如果所有乳糖胆盐发酵管都不产酸不产气,那么粪大肠菌群即为阴性。
如果有产酸产气或只产酸的发酵管,那么需要从这些发酵管中分别挑取发酵液,并在伊红美蓝琼脂平板上进行划线。然后,将这些平板置于36℃±1℃的条件下培养18h至24h。
从上述的分离平板上挑取可疑菌落,进行革兰氏染色。如果染色反应为阳性,那么粪大肠菌群为阴性。如果为革兰氏阴性无芽胞杆菌,那么需要挑取同样的菌落接种在乳糖发酵管中,并在44.5℃±0.5℃的条件下培养24h±2h。
对上述乳糖发酵管进行观察,如果不产气,那么粪大肠菌群为阴性;如果产气,那么粪大肠菌群为阳性。
如果粪大肠菌群为阳性,那么需要根据粪大肠菌群阳性发酵管数,查阅MPN检索表,从而得出每克(毫升)肥料样品中的粪大肠菌群数。
以上就是肥料中粪大肠菌群的测定步骤。测定过程中需要注意无菌操作,避免污染。此外,实验结果的准确性会受到多种因素的影响,包括样品的处理、培养条件、观察结果等,因此需要严格按照操作步骤进行实验,并对结果进行准确的解读。